CWL-M萃取設備對草本植物中總黃酮提取工藝研究
探討常壓下水煎煮法提取草本植物中總黃酮的工藝。防法」采用料液比、煎煮溫度和煎煮時間為主要因素進行正交試驗,以確定總黃酮的最佳提取工藝。嘴果」草本植物中總黃酮的最佳提取條件為料液比1:5 g/L?煮沸,煎煮時間75 min,在此條件下總黃酮得率約為0. 734% 。為后續草本植物飲料產品的研發提供了相關資料。
近年來,隨著生活水平的提高,人們對于保健越來越重視,對于保健品的認識也逐漸趨于理性化。由此,促進了一些基于草本植物保健飲品生產企業的發展。草本植物中含有各種生物活性成分,如總黃酮、總皂普、各種活性多糖以及一些抗氧化物質等。目前,對于草本植物中各種活性成分的提取主要有水煎煮法、超臨界流體萃取、超濾膜分離技術、大孔吸附樹脂分離純化技術、超聲提取技術以及微波萃取技術等。其中,水煎煮法是最傳統的提取方法,它是在草本植物中加入適量的水,然后加熱至一定溫度并保持一定時間后濾出煮液的方法。該方法不僅簡便易行,而且能煎出大部分有效成分,是最常用的提取草本植物中活性成分的方法之一。筆者以某公司提供的草本植物為原料,研究水煎煮法提取其總黃酮的工藝,以期為后續草本植物飲品的研發提供相關資料。
草本植物中總黃酮提取工藝。工藝流程見圖1。
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具體步驟為:取一小包裝草本植物,平均約170 g,用清水反復沖洗3次,清除表面雜質和灰塵等。按料液比1:5 g幾加水,加熱至沸騰并維持75 min,使草本植物中的總黃酮最大量浸出。煎煮結束后,先采用6層紗布進行粗濾,濾除較大的草本植物殘渣,所得濾液再用高速離心機5 000 r/min離心10min,分離除去細微殘渣,最后得澄清提取液。測定所得提取液中的總黃酮含量。
總黃酮含量測定。
蘆丁對照品溶液配制。精密稱取120℃減壓干燥至恒重的蘆丁50. 5 mg,置于250 ml容量瓶中,加甲醇溶解,置水浴上微熱溶解,冷卻,加甲醇至刻度,搖勻,即得0. 202mg / ml蘆丁對照品溶液。
測定波長的選擇。
精密吸取蘆丁對照品溶液及草本植物提取液各4 ml,置于25 ml量瓶中,加5 % NaNO2溶液1 ml,搖勻,放置6 min,加Al ( NO3 ) 3溶液1 ml,搖勻,放置6min,加4% NaOH溶液1 ml,再用水稀釋至刻度,搖勻,15 min后置1 cm比色皿中,隨行試劑作空白對照,在300 ~600 nm掃描,找到最大吸收波長。
標準曲線的繪制。精密吸取蘆丁對照品溶液0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0 ml置于25 ml量瓶中,。以濃度(C)與吸光值(A)進行直線回歸,得線性回歸方程及相關系數。
樣品中總黃酮含量測定。精密吸取草本植物提取液4 ml于25 ml容量瓶中,平行操作3次,同時設空白對照。
試驗設計。
為確定總黃酮的最佳提取工藝,以料液比、煎煮溫度和煎煮時間為主要因素進行正交試驗。正交試驗因素水平見表to1.2.4總黃酮得率計算。根據以下公式計算:
????總黃酮得率=(提取液中總黃酮的含量/草本植物試樣的質量)x 100%
標準曲線的繪制經波譜掃描蘆丁最大吸收波長為510 nm,在510 nm處測定不同濃度下蘆丁溶液的吸光值,并繪制標準曲線,見圖2。
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由圖2得線性回歸方程為A =12. 369C -0. 1191,相關系數(R2)為0. 924 5,曲線在0.01~0.05?mg / ml范圍內有良好的線性關系。
????最佳提取工藝的確定由表2可知,3個因素對總黃酮提取的影響主次關系為煎煮溫度>料液比>煎煮時間,同時得出最佳工藝為料液比1:7 g/L,沸水,煎煮時間75 min,此時所得提取液中總黃酮含量為1 280 mg。從表2還可以看出,料液比也可選為1:5 g/L,在此條件下提取液中總黃酮含量為1 247 mg,雖然產量稍低,但可為企業大幅度降低生產成本。因此,最終確定總黃酮的提取工藝為料液比1:5 g/L,沸水,煎煮時間75 min,此時總黃酮得率約為0. 734%
3小結
????試驗以草本植物為原料,采用傳統水煎煮法提取其中的生物活性物質總黃酮,并結合生產實際得出最佳提取工藝條件:料液比1:5 g/L,沸水,煎煮時間75 min,此條件下總黃酮得率約為0. 734% .
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