植物提取基礎(chǔ)處理黃酮類化合物的分離、純化

????1溶劑萃取法

溶劑萃取法是根據(jù)待分離的物質(zhì)在兩種溶劑中的溶解度不同來實(shí)現(xiàn)分離的，在分離的過程中可以根據(jù)待分離物質(zhì)的極性不同，不同極性的溶劑可以對待分離的物質(zhì)起到一個初步的純化過程。溶劑萃取法操作方便，使用的設(shè)備比較簡單，但是和現(xiàn)代的分離技術(shù)相比，其分離效率低，并且以手工萃取為主，操作的重現(xiàn)性差。路世武等人[[33]研究了溶劑萃取法萃取番茄紅素的最佳工藝條件，研究結(jié)果表明二氯甲烷具有沸點(diǎn)低，易于分離回收等優(yōu)點(diǎn)，可以有效的萃取番茄紅素，在提取時間60 min，提取溫度38℃，提取次數(shù)3次，料液比1:3的條件下番茄紅素的提取效率最高。植物提取基礎(chǔ)處理黃酮類化合物的分離、純化

2硅膠柱層析法

硅膠層析法分離的原理是根據(jù)不同極性的物質(zhì)在硅膠上的吸附能力不同，一般情況下極性較大的物質(zhì)容易被硅膠吸附，極性較弱的物質(zhì)不容易被硅膠吸附，所以弱極性物質(zhì)會先被洗脫下來，極性越強(qiáng)的物質(zhì)越不容易被洗脫，所以整個層析過程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸的過程。硅膠柱層析法主要適合于分離異黃酮、二氫黃酮、二氫黃酮醇及高度甲基化的黃酮及黃酮醇類化合物。姚某等人使用硅膠對大豆異黃酮主要單體組分的分離方法進(jìn)行了研究，研究結(jié)果表明使用300-400口的硅膠，洗脫劑為氯仿一甲醇((5 : 1，v/v)、流迷為1.0 mL/min的條件下，可以很好的分離染料木普、大豆普、染料木黃酮和大豆普元4種大豆中主要的單體組分，并且對大豆異黃酮普元的分離效果更好。

3聚酞胺柱層析法

對黃酮類化合物的分離來說，聚酞胺是較為理想的吸附劑，因?yàn)榇蠖鄶?shù)黃酮類化合物都具有一定數(shù)口的輕基。聚酞胺層析法的主要原理是氫鍵吸附，在分離過程中，吸附強(qiáng)度由分子中的輕基數(shù)口與位置，以及溶劑與黃酮類化合物或溶劑與聚酞胺之間形成氫鍵締合能力的大小來決定的。但是聚酞胺的死吸附高，不適合于在原料比較少的條件下進(jìn)行分離。白云娥等人[[35]比較了三種聚酞胺對金蓮花中的總黃酮的分離效果，發(fā)現(xiàn)使用60-80目聚酞胺對金銀花總黃酮的吸附與解吸效果最好，并且上樣藥液的最佳pH值為3，上樣濃度為1: ?3 (g/mL)?最大吸附容量為0.2833 g/mL，洗脫溶劑為水和50%的乙醇。植物提取基礎(chǔ)處理黃酮類化合物的分離、純化

4葡聚糖凝膠柱色譜法

葡聚糖凝膠柱色譜法的分離原理是:在分離的過程中，分子量大的物質(zhì)由于未進(jìn)入葡聚糖凝膠柱的內(nèi)部使其能迅迷的流出，相對分子質(zhì)量比較小的物質(zhì)，能進(jìn)入葡聚糖凝膠柱的空穴內(nèi)，所以其流出迷度比較慢，所以在使用葡聚糖凝膠色譜柱分離黃酮類化合物時，黃酮類化合物是以相對分子量遞減的次序依次被洗脫的，葡萄糖凝膠柱色譜法適用于經(jīng)過紙色譜、薄層色譜、硅膠及聚酞胺色譜分離得到的較高純度物質(zhì)的進(jìn)一步分離。蔣某等人先使用聚酞胺色譜，分離出了黎篙提取物中的黃酮普元和黃酮普類化合物，然后利用Sephadex LH-20對黃酮普類化合物進(jìn)行了分離純化，最后根據(jù)化合物的理化性質(zhì)和波譜特征鑒定了分離出的化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，兩種化合物分別是柯依利素-7-0-β-D-葡萄糖普和榭皮素-7-0-β-D-木糖普。

5梯度pH萃取法

梯度pH萃取法適合于對酸性強(qiáng)弱具有明顯不同的黃酮普元的分離。黃酮普元類化合物中酚輕基的數(shù)口及位置的不同會造成其酸性強(qiáng)弱也不同，所以在分離的過程中，可以先將混合物溶于有機(jī)溶劑后，依次使用不同強(qiáng)度的堿液進(jìn)行梯度萃取，然后使用酸中和，將混合物中的黃酮類化合物游離出來，最后使用有機(jī)溶劑進(jìn)行反萃取，將所需要的有效成分分離出來的一種方法，汪某等人對葛花總黃酮的提取和純化工藝進(jìn)行了研究，主要研究了正丁醇萃取層葛花異黃酮的精制，發(fā)現(xiàn)僅僅依靠正丁醇不能很好的純化葛花異黃酮，考慮到大多數(shù)的葛花異黃酮有兩個以上的酚輕基，所以易于與弱堿形成鹽，所以在純化的過程中可以使用不同濃度的碳酸鈉可以對葛花中的異黃酮進(jìn)行一個簡單的純化。植物提取基礎(chǔ)處理黃酮類化合物的分離、純化

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6根據(jù)特定的官能團(tuán)進(jìn)行分離

????根據(jù)黃酮類化合物的輕基的位置不同，其化學(xué)性質(zhì)不同，可以分離具有特定官能團(tuán)的黃酮類化合物，但是此種分離方法的使用由于對官能團(tuán)的種類和位置的嚴(yán)格要求受到一定的限制。

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