中藥提取技術(shù)處理黃芪多糖的分離純化

????多糖的結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)和核酸相似，都可分為一級、二級、三級和四級結(jié)構(gòu)。一級結(jié)構(gòu)包括糖基組成、排列順序、糖鏈有無分支、分支的位置和長短等。多糖骨架間以氫鍵結(jié)合所形成的各種聚合物就是其二級結(jié)構(gòu)，除此以外還有三級和四級結(jié)構(gòu)的存在，這說明多糖的結(jié)構(gòu)非常復(fù)雜，對其進行分離純化得到均一組分的多糖，需要多種方法的結(jié)合。

????多糖是動、植物體內(nèi)重要的生物活性物質(zhì)，可以說所有動植物均有多糖。越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，多糖對人體具有極大的利用價值，許多中藥如人參、黃芪、當歸、五味子、夏枯草、蘆根、靈芝等，還有許多營養(yǎng)價值較高的食用菌如香菇、猴頭菇、金針菇等。多糖純化方法很多，多糖的性質(zhì)是其分離純化的基礎(chǔ)[76」，簡單介紹以下幾種常用的方法。中藥提取技術(shù)處理黃芪多糖的分離純化

????1.分級沉淀法

????利用不同多糖分子大小和溶解度不同而分離，常用的有季錢鹽沉淀法和有機溶劑沉淀法。如安絡(luò)小皮傘粗多糖的純化方法，在多糖溶液中加入不同濃度乙醇溶液，得到多個多糖;天門冬冷水浸提物采用丙酮分級沉淀法得到3種多糖;鐵皮石解多糖采用的就是漠化十六烷基三甲胺(CTAB)絡(luò)合精制而得。

????2.凝膠柱層析法

????常用的凝膠有葡聚糖凝膠(Sephadex)和瓊脂糖凝膠(Sepharose)，以不同濃度的鹽溶液和緩沖溶液作為洗脫劑，從而使不同大小的多糖分子得到分離純化，但不適宜粘多糖的分離。一般生藥提取物得以分離多用Sepharose, DEAEToyopearl, Sephacryl, ?Sephadex精致得到各種多糖。如靈芝多糖、附子多糖、白術(shù)多糖、山藥多糖等。

????3.纖維素陰離子交換劑柱層析法

????常用的交換劑為DEAE一纖維素和ECTEOLA一纖維素，分類硼砂型和堿型兩種，洗脫劑可用不同濃度堿溶液、硼砂溶液、鹽溶液，其優(yōu)點可吸附雜質(zhì)、純化多糖，并適用于分離各種酸性、中型多糖和粘多糖。如百合多糖、北沙參多糖、太子參多糖等。中藥提取技術(shù)處理黃芪多糖的分離純化

????4.其他方法

透析、超濾及超速離心選用不同規(guī)格的超濾膜和透析袋進行超濾和透析以及一定條件下的超速離心操作，可按分子大小將多糖樣品分級，超濾和透析更常用于除去小分子物質(zhì)。區(qū)帶電泳主要按多糖的電荷性質(zhì)不同分級，常用的有聚丙烯酞胺凝膠電泳、乙酸纖維素薄膜電泳。

5.1黃芪多糖的提取與純化

????黃芪多糖是黃芪中的重要有效成分，為葡萄糖與阿拉伯糖的多聚體，分子量在兩萬以下。它的主要功效在于提高機體的免疫力，包括體液免疫、細胞免疫、機體非特異性免疫等。它能使動物的脾臟增大，脾內(nèi)漿細胞增生，促進抗體合成，且能對抗強的松等免疫抑制劑的影響。中藥提取技術(shù)處理黃芪多糖的分離純化

查閱相關(guān)資料，黃芪多糖的分離純化多采用水提醇沉，本實驗采用此法得黃芪多糖粗品。醇沉法是目前應(yīng)用最為廣泛的一種精制方法，其原理是中藥有效成分既溶于水又溶于醇，而水提取液中常含有粘液質(zhì)、糊化淀粉、果膠、樹膠、蛋白質(zhì)等，用適當濃度的乙醇可以有效地沉淀除去。如藥液中含醇量達60%可除去淀粉，含醇量達70%時，除蹂質(zhì)、水溶性色素等少數(shù)無效成分外，大部分雜質(zhì)均可沉淀除去。由于這種方法操作簡單，技術(shù)與設(shè)備要求不高，故自七十年代初一直沿用至今，成為目前“法定”的精制方法。

5.2黃芪多糖的純化

????根據(jù)黃芪多糖難溶于濃乙醇的性質(zhì)，可以采用沉淀法對提取液進行純化。具體制備流程如圖5-1，在濃縮和離心分離后的提取液，加入無水乙醇，加入量按達到乙醇濃度為70%(vol%)就可以了。沉淀液靜置24h以上，然后進行離心分離和過濾，沉淀用無水乙醇和丙酮進行多次洗滌，干燥得到黃芪多糖粗品。中藥提取技術(shù)處理黃芪多糖的分離純化

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????本文針對黃芪多糖的提取和純化進行了研究，發(fā)現(xiàn)用高壓提取技術(shù)，黃芪多糖的后續(xù)分離雜質(zhì)少，更容易分離純化，取得比較滿意的效果，但這只是初步的，我們得到的是多糖粗品，要得純品需進一步進行純化，如需除脂、除蛋白、除色素和低聚糖等小分子雜質(zhì)等操作。中藥提取技術(shù)處理黃芪多糖的分離純化

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