有機(jī)相水相分離設(shè)備固相萃取技術(shù)

????固相萃取技術(shù)目前是應(yīng)用比較廣泛的一種先進(jìn)技術(shù)。根據(jù)國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)的報(bào)道，在提取食品中的多胺的前處理技術(shù)中所用的固相萃取柱有:C18柱、硅膠預(yù)處理小柱、陽(yáng)離子交換柱等。

????固相萃取(SPE)是建立在傳統(tǒng)液一液萃取技術(shù)的基礎(chǔ)之上，利用物質(zhì)之間的相互作用，結(jié)合相似相溶原理和高效液相色譜、氣相色譜中的分離原理，逐步發(fā)展起來(lái)的。固相萃取主要用于處理液體樣品中的微量目標(biāo)化合物的分離和富集。比如，污水中各種成分的分析，生物樣品中代謝產(chǎn)物的分析，食品中添加劑的成分分析，蔬菜、水果中殘留農(nóng)藥的分析等，目前應(yīng)用非常廣泛。

????固相萃取(SPE)的主要原理是利用極性的相似相溶原理，將固體吸附劑與液體樣品中的目標(biāo)化合物吸附，使目標(biāo)化合物與雜質(zhì)分離，達(dá)到分離和富集的目的。固相萃取的原理和分離模式與液相色譜基本相同，固相萃取柱的固定相與液相色譜中常用的固定相相同，只是在粒徑上有所區(qū)別，因此其固相萃取柱也可分為正相柱(固定相極性小于洗脫劑極性)，反相柱(固定相極性大于洗脫劑極性)，離子交換柱等。

????在選擇固相萃取柱和洗脫劑時(shí)需要考慮幾點(diǎn):首先，目標(biāo)化合物的極性。目標(biāo)化合物的極性決定了固相萃取柱的選擇，其在有機(jī)溶劑(極性或非極性)中的溶解度則決定了洗脫劑和淋洗液的選擇。其次，目標(biāo)化合物是否與固定相反應(yīng)，形成共價(jià)鍵，有可能造成麻煩。再者，目標(biāo)化合物在基體溶液中是否會(huì)因?yàn)閜H或其它的條件的影響發(fā)生離子化，如會(huì)則可調(diào)節(jié)pH使其離子化，從而選擇離子交換固相萃取柱。最后，目標(biāo)化合物和雜質(zhì)的極性差異，即與固定相的吸附力大小。如差異較小，則有可能造成無(wú)法分離。

????固相萃取的實(shí)驗(yàn)操作一般包括四個(gè)步驟:對(duì)柱子進(jìn)行活化，樣品上柱、用淋洗液淋洗柱子、洗脫目標(biāo)化合物。如圖1-3所示:

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????(1)活化:在上樣之前要先對(duì)固相萃取柱進(jìn)行活化，使得固定相具有吸附目標(biāo)化合物的能力。

????不同分離模式的固相萃取柱多用的活化劑也有所不同，反相萃取柱的固定相為弱極性或非極性的，所以一般用強(qiáng)極性的活化劑，如水、甲醇、乙睛等。正相萃取柱的固定相為極性的，因此一般用弱極性或非極性的溶劑作為活化劑，如正己烷等。離子交換固相萃取柱所用的活化劑則根據(jù)樣品基體的極性來(lái)選擇，如用于非極性溶劑中的樣品時(shí)，可以采用樣品溶劑來(lái)活化固相萃取柱，如用于極性有機(jī)溶劑中的樣品時(shí)，可以用水溶性的有機(jī)溶劑洗柱，然后調(diào)節(jié)適當(dāng)?shù)膒H值，用一定比例的有機(jī)溶劑和鹽的水溶液對(duì)固相萃取柱進(jìn)行淋洗。

????為了使固相萃取小柱中的固定相在活化之后到上樣前能保持濕潤(rùn)，須在活化處理之后在固定相上面保持大約1 mL的活化劑，活化劑的用量一般為所用固相萃取柱柱體積2倍。

????(2)上樣:使樣品進(jìn)入固定相，樣品溶液通過(guò)固定相，目標(biāo)化合物與固定相能夠得到很好的吸附。樣品溶液的極性不能太強(qiáng)，否則分析物不容易在柱中得到很好的保留，造成“穿漏”現(xiàn)象。上樣的主要方法有加壓，抽真空和離心。如圖1-4所示:

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????(3)淋洗:主要目的是洗掉樣品中的雜質(zhì)，使目標(biāo)化合物與干擾物質(zhì)得到很好的分離。淋洗液的選擇則取決于雜質(zhì)成分的極性，要保證目標(biāo)化合物在固相萃取柱中得到很好保留的前提下，可以將盡可能多的雜質(zhì)洗脫下來(lái)。

(4)洗脫:將目標(biāo)化合物從固相萃取柱中洗脫下來(lái)。洗脫劑的選擇一般采用與固定相極性相反、目標(biāo)化合物極性相似的有機(jī)溶劑。

其它先進(jìn)的前處理技術(shù)

????固相微萃取技術(shù)(SPME)}:固相微萃取技術(shù)是建立在固相萃取技術(shù)之上的一種新型樣品前處理技術(shù)。它將樣品的采集和濃縮融為一體，操作簡(jiǎn)便，沒(méi)有溶劑的干擾，不會(huì)造成二次污染，其選擇性和回收效率較高，是目前一種既環(huán)保又高效的前處理技術(shù)，前景較好。

????微波萃取技術(shù)(MAE):微波萃取技術(shù)是利用分子的極性來(lái)進(jìn)行分離的，如極性分子能夠迅速吸收微波能量，從而使得極性溶劑的溫度升高，如甲醇、乙醇、丙酮或水等。而非極性分子則不能夠吸收微波能量，因此非極性溶劑不能被加熱，所以在微波萃取技術(shù)中不能使用全部的非極性溶劑作為萃取劑，通常在非極性溶劑中加入一些極性溶劑來(lái)作為萃取劑。比如，丙酮一環(huán)己烷(V:V=1:1)就可以用來(lái)作為微波萃取劑。

????凝膠滲透色譜(GPC)凝膠滲透色譜技術(shù)主要用來(lái)去除脂肪類(lèi)物質(zhì)或其它分子量相對(duì)較高的化合物。該技術(shù)不僅對(duì)油脂類(lèi)物質(zhì)的凈化效果好，而且分析結(jié)果重現(xiàn)性較好，所用柱子可以進(jìn)行重復(fù)使用。該方法適用的樣品范圍非常廣，回收的農(nóng)藥品種也較多，回收率較高，目前己經(jīng)成為農(nóng)藥多殘留的分析中的通用凈化方法。

????加速溶劑萃取技術(shù)(ASE):加速溶劑萃取技術(shù)是一種全新的用于處理固體和半固體樣品的方法。該方法是在較高溫度(約50~200℃)和較高壓力(10.3~20.6MPa)條件下，利用有機(jī)溶劑進(jìn)行萃取。該技術(shù)的最主要的優(yōu)點(diǎn)是有機(jī)溶劑用量少，處理過(guò)程快速且回收率高。該技術(shù)己成為樣品前處理的最佳方法之一，并被美國(guó)環(huán)保局(EPA)選定為推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法，被廣泛應(yīng)用于環(huán)境、食品和藥物等樣品的前處理中，特別是食品中的農(nóng)藥殘留量的分析。

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